Tarifvertrag kat k4

Aug 5 2020 • Posted in Uncategorized

Am 3. Juni ratifizierten die Mitglieder von Unifor Local 112 Toromont-Concord einen neuen dreijährigen Tarifvertrag mit Toromont LTD. Um festzustellen, ob NuA4 KAT eine direkte Rolle bei der Erleichterung der Antisense-Transkription vom 3-Zoll-Ende der GAL10-Codierungssequenz spielt, analysierten wir die Assoziation von Myc-Epitop-getaggtem Esa1p mit dem GAL10 3-End-End in einem dextrosehaltigen Wachstumsmedium. Wir fanden eine signifikante Assoziation von Myc-markierten Esa1p mit dem 3″-Ende der GAL10-Codierungssequenz (Region O in Abb. 1A) im Vergleich zum unspezifischen Anti-HA-Antikörper (oder Hintergrundsignal) (Abb. 2A und andB). B). Als Negativkontrolle analysierten wir auch die Assoziation von Myc-getaggtem Esa1p mit 18S rDNA (oder dem Gen, das durch RNA-Polymerase I transkribiert wurde) und fanden heraus, dass das Mit-Myc-markierte Esa1p-ChIP-Signal mit dem von Anti-HA (oder Hintergrund) identisch war (Abb. 2A und andB). B). Weiterhin wurde die PCR-Analyse für 18S rDNA im linearen Bereich durchgeführt, da das Verhältnis der Myc-markierten Esa1p- und HA-Signale bei verschiedenen Verdünnungen nicht signifikant verändert wurde (siehe Abb. S2 im Zusatzmaterial). Unsere Ergebnisse unterstützen daher, dass Esa1p mit dem GAL10 3-Ende verbunden ist, an dem antisense transkription initiiert wird.

Eine ähnliche Rekrutierung von Esa1p wurde jedoch am 5-Zoll-Ende der GAL10-Codierungssequenz (Region M in Abb. 1A) oder gal1-Kernpromotor (Region P in Abb. 1A) im dextrosehaltigen Wachstumsmedium (Abb. 2C) nicht beobachtet. NuA4 KAT assoziiert die UAS der NuA4-abhängigen ribosomalen Proteingene für die TAF-abhängige Sinnestranskription (17,-19). So zeigten wir als positiv zu kontrollieren, dass Esa1p mit der UAS eines ribosomalen Proteingens RPS5 assoziiert ist, jedoch nicht mit einer inaktiven Region innerhalb des Chromosoms V (Chr.-V) (Abb. 2D und andE),E), im Einklang mit früheren Studien (17, 18). Unsere Ergebnisse zeigen, dass Esa1p mit der GAL10 Antisense Transkriptions-Initiations-Website assoziiert ist. Eine solche Verbindung von NuA4 KAT mit GAL10 ist abhängig von der Reb1p-Bindungsseite (Abb.

2F), die Reb1p zur GAL10 Antisense Transcription Initiation Site rekrutiert, um die Transkription auszulösen (15). Als Kontrolle haben wir gezeigt, dass das Targeting von NuA4 KAT auf die RPS5 UAS in Ermangelung der Reb1p-Bindungsstelle (Abb. 2F) nicht verändert wird, da die Reb1p-Bindungsseite beim RPS5-Promoter/UAS fehlt. Beim RPS5 Promoter/UAS hängt die Rekrutierung von NuA4 KAT von der RPG-Box ab, die auf den Aktivator Rap1p (17,-19) abzielt.

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